Generación de un nuevo modelo de tendinopatía rotuliana en ratas que imita la patología deportiva humana: estudio piloto

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Es una patología frecuente que afecta a la inserción proximal del tendón rotuliano y es una de las formas más comunes de tendinopatía crónica en deportistas2. Aunque se han propuesto numerosas teorías, las causas de la fisiopatología de la tendinopatía rotuliana todavía son poco conocidas3,4. Cook y Purdam5 propusieron un modelo basado en el continuum de la patología tendinosa. Este modelo considera 3 fases que pueden sobreponerse e interconectarse a lo largo del tiempo: tendinopatía reactiva, deterioro del tendón (fallo del proceso de cicatrización) y tendinopatía degenerativa. Este modelo propone que la carga de trabajo del tendón desempeña un papel esencial al inicio y en la progresión de la tendinopatía5. Los resultados que se encuentran comúnmente en deportistas son una tendinopatía degenerativa, caracterizada por un aumento de la matriz no colágena (proteoglicanos), degeneración mucoide con fibrosis variable, neovascularización y aumento de la celularidad debida a los fibroblastos6. Por otro lado, Fu et al.7 también propusieron un modelo de tres etapas caracterizado por una lesión inicial, un proceso de cicatrización y una manifestación clínica ineficaz. A pesar de la importancia clínica de la tendinopatía, su fisiopatología y evolución clínica siguen siendo poco conocidas, lo que restringe las intervenciones terapéuticas. El avance en el conocimiento y la comprensión de la evolución clínica de la tendinopatía presenta importantes limitaciones, no solo en los obstáculos para obtener muestras de tejido humano de deportistas, sino también debido a que estas muestras representan solo las etapas finales de los procesos patológicos con un inicio y duración no revelados8-10. Por esta razón, se han propuesto varios modelos animales para el estudio de la tendinopatía, aunque sus similitudes con la tendinopatía humana y su idoneidad para estudiar la fisiopatología del tendón rotuliano todavía son controvertidos11-13. Se han descrito varios modelos animales para estudiar la tendinopatía rotuliana, como las lesiones del tendón inducidas quirúrgicamente14-22, inyección intratendinosa de colagenasa23-31, por administración de sustancias biológicas32,33 o inducida por sobrecarga34-36. Sin embargo, la mayoría de ellos se utilizan para verificar los abordajes terapéuticos y solo unos pocos se usan para describir los mecanismos patológicos de la tendinopatía rotuliana. Por esta razón, el presente trabajo propone la creación de un nuevo modelo animal capaz de reproducir la tendinopatía rotuliana de la porción proximal profunda que se observa comúnmente en deportistas. Este modelo podría permitirnos estudiar y comprender la evolución patológica de la tendinopatía en su porción proximal, así como evaluar la efectividad de nuevas intervenciones terapéuticas para fomentar los procesos de regeneración del tendón rotuliano.Material y métodosAnimales El modelo animal experimental utilizado fueron ratas Wistar macho de 8 semanas (Harlan). Se usaron un total de 4 animales. Las ratas se mantuvieron a 22-24 °C en ciclos de 12 h de luz/oscuridad, con acceso sin límite a comida y agua. Todos los procedimientos se llevaron a cabo de acuerdo con las legislaciones española (Real Decreto 53/2013) y europea (2010/63/EU) y aprobados por el Departament d’Agricultura, Ramaderia, Pesca, Alimentació i Medi Natural del Gobierno Catalán (Generalitat de Catalunya).Modelo de lesión basado en la colagenasa Los animales fueron anestesiados mediante inyección intraperitoneal de una mezcla de ketamina (75 mg/kg) y xilazina (10 mg/kg) y colocados en posición supina, con la articulación de la rodilla izquierda hacia arriba, antes del procedimiento quirúrgico. El proceso quirúrgico de producción de la lesión del tendón rotuliano se ilustra en la figura 1. La articulación de la rodilla se rasuró previamente y se esterilizó con alcohol al 70%. La lesión del tendón se generó mediante inyección guiada por ultrasonido de una solución de colagenasa al 10% disuelta en solución salina previamente filtrada para esterilización con un filtro de 0,22 µm (Nalgene), usando una aguja de 29 G (0,33 mm de diámetro interno). La intervención se realizó en el lado anterior de la rodilla, insertando la aguja en la porción proximal del tendón hasta llegar a las fibras profundas. Una vez en el área seleccionada, se liberaron 20 µl de solución de colagenasa en el área de inserción proximal del tendón (fig. 1). Después de la intervención quirúrgica, se administró analgesia posquirúrgica (buprenorfina 0,01 mg/kg) por vía subcutánea a todos los animales. Nuestro estudio siguió los estándares éticos en el deporte y la investigación en ciencias del deporte37.<img alt="Figura 1 Modelo de lesión basado en la aplicación de colagenasa. Se administró una dosis de colagenasa en la porción proximal profunda del tendón rotuliano con infiltración guiada por ultrasonido (*)." src="277v52n194-90461315fig1.jpg"></img>Figura 1 Modelo de lesión basado en la aplicación de colagenasa. Se administró una dosis de colagenasa en la porción proximal profunda del tendón rotuliano con infiltración guiada por ultrasonido (*).Análisis mediante resonancia magnética Se realizaron estudios de resonancia magnética 1H in vivo en la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB, Barcelona, España) usando BioSpec 70/30 USR (7T) de Bruker (Bruker BioSpin GmbH, Ettlingen, Alemania) con un miniequipo de resonancia con gradiente (400 mT/m) y una bobina transceptora de cuadratura de 72 mm de diámetro interno. Las ratas se colocaron en un lecho, lo que permitió el suministro de anestesia (isoflurano, 1,5-2,0% en O2 a 1 l/ min), con un circuito de agua caliente integrado para la regulación de la temperatura corporal. La temperatura corporal se midió con una sonda rectal y se mantuvo a 37 ±1 °C. Se controló la frecuencia respiratoria con una sonda de presión y se mantuvo entre 60 y 80 respiraciones/min. Se obtuvieron inicialmente imágenes rápidas de eco de espín de baja resolución, calibradas en T2, en planos axial, sagital y coronal para ser utilizadas como imágenes scout de referencia. Los parámetros de imagen de estas imágenes fueron: tiempo de eco efectivo (TEeff) = 36 ms; tiempo de repetición (TR) = 3 s; longitud del tren de ecos (ETL) = 8; campo de visión (FOV) = 6 × 6 cm2; tamaño de la matriz (MTX) = 128 × 128; grosor de corte (ST) = 2 mm; separación entre cortes (gap) = 0,5 mm; número de cortes de imágenes (NS) = 25 axiales, 10 sagitales, 11 coronales; número de medias (NA) = 1. Se obtuvieron imágenes de eco de espín rápido de alta resolución en T2 en planos sagitales que contenían la lesión y el lado contralateral. Los parámetros experimentales de estas imágenes fueron: TEeff = 30 ms; TR = 4 s; ETL = 8; FOV = 3,2 × 3,2 cm2; MTX = 256 × 256; ST = 1 mm; gap = 0,1 mm; NS = 18; NA = 12; tiempo experimental = 25 min 36 s. Los datos de resonancia magnética se obtuvieron y fueron procesados en un ordenador con el sistema operativo Linux mediante el software Paravision 5.1 (Bruker BioSpin GmbH, Ettlingen, Alemania) (fig. 2).<img alt="Figura 2 Durante les pruebas de resonancia magnética se controló la temperatura y la frecuencia cardíaca a los animales anestesiados. Se obtuvieron imágenes sagitales en alta resolución de secuencias rápidas de eco de espín ponderadas en T2 de los tendones lesionados rotuliano y contralateral." src="277v52n194-90461315fig2.jpg"></img>Figura 2 Durante les pruebas de resonancia magnética se controló la temperatura y la frecuencia cardíaca a los animales anestesiados. Se obtuvieron imágenes sagitales en alta resolución de secuencias rápidas de eco de espín ponderadas en T2 de los tendones lesionados rotuliano y contralateral.Análisis histológico Los animales fueron sacrificados 7 días después de la lesión mediante la administración intraperitoneal de una sobredosis de ketamina (75 mg/kg) y xilazina (10 mg / kg). Inmediatamente se extrajeron los tendones de ambas piernas desde la rótula a la inserción de la tibia, incluyendo la almohadilla grasa de Hoffa. Las muestras se congelaron en 2-metilbutano (Alfa Aesar, Johnson Matthey Company, Karlsruhe, Alemania) previamente sobreenfriadas en nitrógeno líquido y almacenadas a −80 °C hasta su uso. Las muestras de tendón se seccionaron longitudinalmente (10 µm de espesor) utilizando un criotomo (Leica Microsystems, Wetzlar, Alemania) a −20 °C y se montaron en un portaobjetos de Polilisina® (VWR, Lovaina, Bélgica). Para el análisis histológico se utilizaron secciones consecutivas de tendones congelados. Se realizó la tinción de las muestras con hematoxilina-eosina (1 min de hematoxilina y 15 s de eosina), se lavaron con agua y se deshidrataron con soluciones de gradiente de etanol (1 × 50% de etanol, 2 × 70% de etanol, 2 × 90% de etanol, 2 × 100% de etanol, 1 min cada uno) y se aclararon con xileno (5 s). Después del secado con aire, los portaobjetos se montaron con un medio DPX y un cubreobjetos (VWR, Madrid, España). Se obtuvieron microfotografías a través de un microscopio BX-61 (Olympus) equipado con una cámara DP72 (Olympus) y el software de tratamiento digital de imágenes CellSens® (versión 1.9).ResultadosAnálisis de la lesión del tendón rotuliano mediante resonancia magnética Se compararon imágenes sagitales mediante resonancia magnética de tendones rotulianos sanos y lesionados. No se detectaron diferencias de alineamiento o grosor de las fibras tendinosas a lo largo del tejido del tendón. Se observó edema difuso que afectaba principalmente a las estructuras articulares y musculares (fig. 3).<img alt="Figura 3 Estudio comparativo mediante resonancia magnética. No se encontraron diferencias en la estructura del tendón rotuliano sano (A) y el tendón lesionado (B)." src="277v52n194-90461315fig3.jpg"></img>Figura 3 Estudio comparativo mediante resonancia magnética. No se encontraron diferencias en la estructura del tendón rotuliano sano (A) y el tendón lesionado (B).Análisis macroscópico de la lesión del tendón Se encontraron diferencias macroscópicas manifiestas entre tendones sanos y lesionados. Así, el tendón sano evidenciaba un color blanco brillante e intenso y una fuerte consistencia, mientras que el tendón lesionado presentaba un color marrón amarillento y una apariencia gelatinosa. Se observó que los tejidos periarticulares, principalmente los músculos esqueléticos adyacentes, presentaban cambios de color y consistencia (fig. 4).<img alt="Figura 4 Análisis microscópico. Comparación del tendón sano (izquierda) y del lesionado (derecha). El tendón lesionado es de un color marrón amarillento y de una apariencia gelatinosa (flecha y cabeza de flecha)." src="277v52n194-90461315fig4.jpg"></img>Figura 4 Análisis microscópico. Comparación del tendón sano (izquierda) y del lesionado (derecha). El tendón lesionado es de un color marrón amarillento y de una apariencia gelatinosa (flecha y cabeza de flecha).Análisis histológico del tendón rotuliano El tendón contralateral sano mostró un aspecto uniforme, presentando fibras de colágeno compactas y bien alineadas. Los tenocitos mostraron forma de huso y se localizaron en paralelo a la muestra de fibras tendinosas. La estructura de la grasa de Hoffa mostró características normales. Por el contrario, en el tendón lesionado se observó claramente una degeneración de la estructura de la fibra de colágeno, mostrando también una estructura ondulada evidente y espacios vacíos entre los haces de fibras adyacentes al nivel del tercio proximal del tendón rotuliano. También se observó una fragmentación parcial de las fibras del tendón en el lugar de la inyección. Asimismo, se detectó una clara desorganización del tejido graso de Hoffa, lo que sugiere su afectación y alteración como consecuencia de la administración de colagenasa (fig. 5).<img alt="Figura 5 Estudio histológico comparativo del tendón sano (A) y del lesionado (B). El tendón lesionado presenta degeneración de la estructura del colágeno en el lugar de la punción (*)." src="277v52n194-90461315fig5.jpg"></img>Figura 5 Estudio histológico comparativo del tendón sano (A) y del lesionado (B). El tendón lesionado presenta degeneración de la estructura del colágeno en el lugar de la punción (*).Discusión El principal hallazgo del presente estudio fue la demostración de la similitud de las alteraciones estructurales del tendón rotuliano de la rata, tratado con colagenasa, caracterizado por la desorganización de las fibras de colágeno y estructuras adyacentes, con respecto a la tendinopatía rotuliana observada en la clínica de los humanos. Estos resultados sugieren que la administración de una única dosis de colagenasa infiltrada guiada por ecografía es eficaz para reproducir exactamente los cambios estructurales en la integridad de la región proximal del tendón rotuliano de la tendinopatía rotuliana humana. Por primera vez, se generó un modelo animal que imita la degeneración del tejido tendinoso en el lugar anatómico más común observado en la tendinopatía rotuliana humana. Se han desarrollado otros modelos animales de tendinopatía para inducir la degeneración tisular en la parte media del tercio del tendón rotuliano a través de una «ventana» creada quirúrgicamente14-22. Este mecanismo de lesión no reproduce la lesión detectada en clínica humana, ya que los defectos creados quirúrgicamente se generan en áreas tendinosas distintas al sitio más común donde se produce la patología tendinosa, por lo que se plantea la hipótesis que los mecanismos de reparación del tendón de estos modelos no reproducen la patología del tendón sometido a cargas de trabajo repetitivas35,38. Nuestro modelo está dirigido a imitar la degeneración de las fibras proximales profundas, ya que tanto la biomecánica como la relación de la región proximal del tendón rotuliano con las estructuras adyacentes, principalmente con la almohadilla grasa de Hoffa, son importantes, no solo para el desarrollo de la tendinopatía, sino también en los procesos de cicatrización del tendón39,40. Se considera que la carga de trabajo excesiva del tendón durante un entrenamiento físico intenso es la causa principal de la degeneración patológica41. Por esta razón, se ha utilizado el entrenamiento como modelo para inducir la tendinopatía rotuliana36,42,43. El principal inconveniente de esta técnica se basa en la necesidad de pasar un largo perío do de tiempo en entrenar a los animales con el fin de desarrollar los cambios patológicos característicos de la tendinopatía rotuliana humana. En nuestra opinión, sería interesante crear un modelo combinado de degeneración del tendón rotuliano basado en una lesión inicial mediante inyección intratendinosa a base de colagenasa en la región proximal profunda seguida de un período de entrenamiento físico intenso con el fin de inducir más rápidamente la degeneración patológica característica del tendón rotuliano. Datos previos reportados en modelos de tendinopatía de Aquiles generados por la administración de colagenasa peritendinosa guiada por ecografía sugieren que la administración de colagenasa puede conducir a tendinopatía en ratas y que la elastasa también podría estar implicada en el desarrollo de tendinopatía crónica44. En nuestro estudio existen algunas limitaciones. La primera es la pequeña cantidad de animales (n = 4) utilizada en el estudio. En segundo lugar, debería optimizarse la dosis de colagenasa para reproducir exactamente los cambios característicos en la tendinopatía rotular humana y prevenir el daño colateral de estructuras adyacentes al tendón. Perucca Orfei et al.45 generaron un modelo en el tendón de Aquiles de los ratones que reproduce estrechamente los cambios histológicos observados en la tendinopatía de Aquiles en humanos. Evaluaron el efecto de dos dosis de colagenasa administrada intratendinosa (1 y 3 mg/ml). Aunque ambas dosis indujeron a la desorganización de las fibras de colágeno y al aumento de la celularidad, el tratamiento con mayor dosis de colagenasa pudo inducir una mayor neovascularización y degeneración de la grasa, siendo también cambios dependientes del tiempo. En nuestro estudio estos cambios no se observaron, ya que el tiempo transcurrido desde la administración de colagenasa al análisis de tendones fue más corto. Además, Perucca Orfei et al. presentaron el tendón mediante una incisión longitudinal de la piel, mientras que nosotros utilizamos una técnica mínimamente invasiva basada en la aplicación de colagenasa guiada por ecografía para inducir tendinopatía en la región de las fibras proximales profundas específicas del tendón rotuliano con la perturbación mínima de las estructuras y tejidos de la articulación de la rodilla. Además, nuestro análisis realizado por resonancia magnética demuestra que el efecto de la colagenasa no se localiza exclusivamente a nivel del tendón, sino que también podría afectar a las estructuras periarticulares, circunstancia que no se ha discutido en estudios anteriores. En resumen, nuestro estudio sugiere que la administración de una solución de colagenasa guiada por ecografía en la región proximal profunda del tendón rotuliano podría constituir un modelo coherente para reproducir la degeneración y los cambios habitualmente vistos en la tendinopatía rotuliana en humanos. Este nuevo modelo también nos permitirá desarrollar nuevas terapias dirigidas a mejorar y curar la tendinopatía rotuliana como un paso previo para iniciar ensayos clínicos en pacientes humanos.Financiación Este artículo no ha contado con ninguna fuente de financiación.Conflicto de intereses Los autores declaran que no tienen ningún conflicto de intereses directamente relacionado con el contenido de este artículo.Agradecimientos Los autores agradecen al Departament de Cirurgia de la Facultat de Medicina de la Universitat Autònoma de Barcelona (UAB). En el momento de la redacción de este estudio, David Domínguez era estudiante de doctorado de la UAB y este trabajo forma parte de su tesis doctoral realizada en dicho departamento bajo la dirección y supervisión del Dr. Gil Rodas y el Dr. Mario Marotta.<hr></hr> Recibido el 22 de diciembre de 2016; aceptado el 11 de enero de 2017Correo electrónico:<a href="mailto:david.dominguez@fcbarcelona.cat" class="elsevierStyleCrossRefs">david.dominguez@fcbarcelona.cat</a> (D. Domínguez)" "pdfFichero" => "277v52n194a90461315pdf001.pdf" "tienePdf" => true "PalabrasClave" => array:2 [ "es" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Palabras clave" "identificador" => "xpalclavsec937331" "palabras" => array:1 [ 0 => "Tendón; Modelo; Colagenasa" ] ] ] "en" => array:1 [ 0 => array:4 [ "clase" => "keyword" "titulo" => "Keywords" "identificador" => "xpalclavsec937332" "palabras" => array:1 [ 0 => "Tendon; Model; Collagenase" ] ] ] ] "tieneResumen" => true "resumen" => array:2 [ "es" => array:1 [ "resumen" => " Introducción: La fisiopatología de la tendinopatía rotuliana no es del todo conocida. Es difícil obtener muestras clínicas de deportistas que permitan conocer el desarrollo de la tendinopatía, sobre todo en las primeras etapas. Por este motivo, el propósito de este estudio es desarrollar, en una primera fase, un modelo experimental de tendinopatía rotuliana en ratas que simule la tendinopatía humana mediante la aplicación in vivo de colagenasa en la porción proximal del tendón rotuliano. Material y métodos: El modelo experimental utilizado fueron ratas Wistar macho de 8 semanas de edad (n = 4). La administración de colagenasa se realizó, tras anestesia e inmovilización de los animales, mediante punción guiada por ecografía a nivel de la porción proximal y profunda del tendón rotuliano. La lesión tendinosa se evaluó 48 h después de la lesión mediante resonancia magnética, tras lo cual se procedió a la eutanasia de los animales y a la extracción de los tendones rotulianos para su evaluación histológica. Resultados: El modelo de lesión inducida con colagenasa demostró similitud a nivel de la histología con la tendinopatía rotuliana humana en la región de su inserción proximal. Conclusiones: El modelo experimental de tendinopatía rotuliana en ratas induce la degeneración y distorsión de la arquitectura del tendón rotuliano en su porción proximal, situación similar a la observada en la tendinopatía rotuliana humana, y representa un excelente modelo preclínico para el estudio de nuevas terapias enfocadas al tratamiento de la tendinopatía." ] "en" => array:1 [ "resumen" => " Introduction: Patellar tendon pathophysiology is not still fully understood. The collection of clinical samples from athletes that could permit the analysis of the tendinopathy progression, especially in the early stages, is difficult. For that reason, the purpose of this study is to develop a new experimental animal model of patellar tendinopathy in rats which mimics the human tendinopathy by in vivo intratendinous collagenase injection in the proximal portion of the patellar tendon. Material and methods: The experimental model used was 8-week-old male Wistar rats (n = 4). The administration of collagenase was performed by ultrasound-guided puncture at the level of the proximal and deep portion of the patellar tendon in anesthetized animals. The tendon lesion was evaluated 48 h after injury by magnetic resonance and then, the animals were euthanized and the patellar tendons were collected for histological evaluation. Results: The collagenase-induced lesion model demonstrated important similarities with the human patellar tendinopathy in the region of the proximal insertion. Conclusions: The experimental model of patellar tendinopathy in rat model induces a degeneration and distortion of the patellar tendon architecture in its proximal portion, which closely mimics to that seen in human patellar tendinopathy, and could represent an excellent preclinical model for the study of new therapies focused on treatment of tendinopathy." ] ] "multimedia" => array:10 [ 0 => array:8 [ "identificador" => "fig1" "etiqueta" => "Figura 1" "tipo" => "MULTIMEDIAFIGURA" "mostrarFloat" => true "mostrarDisplay" => false "copyright" => "Elsevier España" "figura" => array:1 [ 0 => array:4 [ "imagen" => "277v52n194-90461315fig1.jpg" "Alto" => 576 "Ancho" => 700 "Tamanyo" => 61830 ] ] "descripcion" => array:1 [ "es" => "Modelo de lesión basado en la aplicación de colagenasa. 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Generación de un nuevo modelo de tendinopatía rotuliana en ratas que imita la patología deportiva humana: estudio piloto

Generation of a new model of patellar tendinopathy in rats which mimics the human sports pathology: A pilot study

David Domíngueza, Paola Contreras-Muñozb, Silvia Lopec, Gil Rodasd, Mario Marottab

a Servicios Médicos, Futbol Club Barcelona, Ciutat Esportiva Joan Gamper, Sant Joan Despí, Barcelona, España.

b Laboratorio de Bioingeniería Ortopédica y Cirugía Pediátrica, Vall d’Hebron Institut de Recerca (VHIR), Hospital Vall d’Hebron, Universitat Autonòma de Barcelona, Barcelona, España. Fundación Leitat, Centro Tecnológico Leitat, Terrassa, Barcelona, España.

c Servicio de Resonancia Magnética, Facultat de Medicina, Universitat Autònoma de Barcelona, Bellaterra, Barcelona, España. Centro de Investigación Biomédica en Red en Bioingeniería, Biomateriales y Nanomedicina (CIBER-BBN), Cerdanyola del Vallès, Barcelona, España.

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tendinopat&#237;a reactiva&#44; deterioro del tend&#243;n &#40;fallo del proceso de cicatrizaci&#243;n&#41; y tendinopat&#237;a degenerativa&#46; Este modelo propone que la carga de trabajo del tend&#243;n desempe&#241;a un papel esencial al inicio y en la progresi&#243;n de la tendinopat&#237;a<span class="elsevierStyleSup">5</span>&#46; Los resultados que se encuentran com&#250;nmente en deportistas son una tendinopat&#237;a degenerativa&#44; caracterizada por un aumento de la matriz no col&#225;gena &#40;proteoglicanos&#41;&#44; degeneraci&#243;n mucoide con fibrosis variable&#44; neovascularizaci&#243;n y aumento de la celularidad debida a los fibroblastos<span class="elsevierStyleSup">6</span>&#46; Por otro lado&#44; Fu et al&#46;<span class="elsevierStyleSup">7</span> tambi&#233;n propusieron un modelo de tres etapas caracterizado por una lesi&#243;n inicial&#44; un proceso de cicatrizaci&#243;n y una manifestaci&#243;n cl&#237;nica ineficaz&#46; A pesar de la importancia cl&#237;nica de la tendinopat&#237;a&#44; su fisiopatolog&#237;a y evoluci&#243;n cl&#237;nica siguen siendo poco conocidas&#44; lo que restringe las intervenciones terap&#233;uticas&#46; El avance en el conocimiento y la comprensi&#243;n de la evoluci&#243;n cl&#237;nica de la tendinopat&#237;a presenta importantes limitaciones&#44; no solo en los obst&#225;culos para obtener muestras de tejido humano de deportistas&#44; sino tambi&#233;n debido a que estas muestras representan solo las etapas finales de los procesos patol&#243;gicos con un inicio y duraci&#243;n no revelados<span class="elsevierStyleSup">8-10</span>&#46; Por esta raz&#243;n&#44; se han propuesto varios modelos animales para el estudio de la tendinopat&#237;a&#44; aunque sus similitudes con la tendinopat&#237;a humana y su idoneidad para estudiar la fisiopatolog&#237;a del tend&#243;n rotuliano todav&#237;a son controvertidos<span class="elsevierStyleSup">11-13</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> Se han descrito varios modelos animales para estudiar la tendinopat&#237;a rotuliana&#44; como las lesiones del tend&#243;n inducidas quir&#250;rgicamente<span class="elsevierStyleSup">14-22</span>&#44; inyecci&#243;n intratendinosa de colagenasa<span class="elsevierStyleSup">23-31</span>&#44; por administraci&#243;n de sustancias biol&#243;gicas<span class="elsevierStyleSup">32&#44;33</span> o inducida por sobrecarga<span class="elsevierStyleSup">34-36</span>&#46; Sin embargo&#44; la mayor&#237;a de ellos se utilizan para verificar los abordajes terap&#233;uticos y solo unos pocos se usan para describir los mecanismos patol&#243;gicos de la tendinopat&#237;a rotuliana&#46; Por esta raz&#243;n&#44; el presente trabajo propone la creaci&#243;n de un nuevo modelo animal capaz de reproducir la tendinopat&#237;a rotuliana de la porci&#243;n proximal profunda que se observa com&#250;nmente en deportistas&#46; Este modelo podr&#237;a permitirnos estudiar y comprender la evoluci&#243;n patol&#243;gica de la tendinopat&#237;a en su porci&#243;n proximal&#44; as&#237; como evaluar la efectividad de nuevas intervenciones terap&#233;uticas para fomentar los procesos de regeneraci&#243;n del tend&#243;n rotuliano&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Material y m&#233;todos</span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Animales</span></p><p class="elsevierStylePara"> El modelo animal experimental utilizado fueron ratas Wistar macho de 8 semanas &#40;Harlan&#41;&#46; Se usaron un total de 4 animales&#46; Las ratas se mantuvieron a 22-24 &#176;C en ciclos de 12 h de luz&#47;oscuridad&#44; con acceso sin l&#237;mite a comida y agua&#46; Todos los procedimientos se llevaron a cabo de acuerdo con las legislaciones espa&#241;ola &#40;Real Decreto 53&#47;2013&#41; y europea &#40;2010&#47;63&#47;EU&#41; y aprobados por el Departament d&#8217;Agricultura&#44; Ramaderia&#44; Pesca&#44; Alimentaci&#243; i Medi Natural del Gobierno Catal&#225;n &#40;Generalitat de Catalunya&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Modelo de lesi&#243;n basado en la colagenasa</span></p><p class="elsevierStylePara"> Los animales fueron anestesiados mediante inyecci&#243;n intraperitoneal de una mezcla de ketamina &#40;75 mg&#47;kg&#41; y xilazina &#40;10 mg&#47;kg&#41; y colocados en posici&#243;n supina&#44; con la articulaci&#243;n de la rodilla izquierda hacia arriba&#44; antes del procedimiento quir&#250;rgico&#46; El proceso quir&#250;rgico de producci&#243;n de la lesi&#243;n del tend&#243;n rotuliano se ilustra en la figura 1&#46; La articulaci&#243;n de la rodilla se rasur&#243; previamente y se esteriliz&#243; con alcohol al 70&#37;&#46; La lesi&#243;n del tend&#243;n se gener&#243; mediante inyecci&#243;n guiada por ultrasonido de una soluci&#243;n de colagenasa al 10&#37; disuelta en soluci&#243;n salina previamente filtrada para esterilizaci&#243;n con un filtro de 0&#44;22 &#181;m &#40;Nalgene&#41;&#44; usando una aguja de 29 G &#40;0&#44;33 mm de di&#225;metro interno&#41;&#46; La intervenci&#243;n se realiz&#243; en el lado anterior de la rodilla&#44; insertando la aguja en la porci&#243;n proximal del tend&#243;n hasta llegar a las fibras profundas&#46; Una vez en el &#225;rea seleccionada&#44; se liberaron 20 &#181;l de soluci&#243;n de colagenasa en el &#225;rea de inserci&#243;n proximal del tend&#243;n &#40;fig&#46; 1&#41;&#46; Despu&#233;s de la intervenci&#243;n quir&#250;rgica&#44; se administr&#243; analgesia posquir&#250;rgica &#40;buprenorfina 0&#44;01 mg&#47;kg&#41; por v&#237;a subcut&#225;nea a todos los animales&#46; Nuestro estudio sigui&#243; los est&#225;ndares &#233;ticos en el deporte y la investigaci&#243;n en ciencias del deporte<span class="elsevierStyleSup">37</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Figura 1 Modelo de lesi&#243;n basado en la aplicaci&#243;n de colagenasa&#46; Se administr&#243; una dosis de colagenasa en la porci&#243;n proximal profunda del tend&#243;n rotuliano con infiltraci&#243;n guiada por ultrasonido &#40;&#42;&#41;&#46;" src="277v52n194-90461315fig1.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 1 </span>Modelo de lesi&#243;n basado en la aplicaci&#243;n de colagenasa&#46; Se administr&#243; una dosis de colagenasa en la porci&#243;n proximal profunda del tend&#243;n rotuliano con infiltraci&#243;n guiada por ultrasonido &#40;&#42;&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">An&#225;lisis mediante resonancia magn&#233;tica</span></p><p class="elsevierStylePara"> Se realizaron estudios de resonancia magn&#233;tica <span class="elsevierStyleSup">1</span>H <span class="elsevierStyleItalic">in vivo</span> en la Universitat Aut&#242;noma de Barcelona &#40;UAB&#44; Barcelona&#44; Espa&#241;a&#41; usando BioSpec 70&#47;30 USR &#40;7T&#41; de Bruker &#40;Bruker BioSpin GmbH&#44; Ettlingen&#44; Alemania&#41; con un miniequipo de resonancia con gradiente &#40;400 mT&#47;m&#41; y una bobina transceptora de cuadratura de 72 mm de di&#225;metro interno&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> Las ratas se colocaron en un lecho&#44; lo que permiti&#243; el suministro de anestesia &#40;isoflurano&#44; 1&#44;5-2&#44;0&#37; en O<span class="elsevierStyleInf">2</span> a 1 l&#47; min&#41;&#44; con un circuito de agua caliente integrado para la regulaci&#243;n de la temperatura corporal&#46; La temperatura corporal se midi&#243; con una sonda rectal y se mantuvo a 37 &#177;1 &#176;C&#46; Se control&#243; la frecuencia respiratoria con una sonda de presi&#243;n y se mantuvo entre 60 y 80 respiraciones&#47;min&#46; Se obtuvieron inicialmente im&#225;genes r&#225;pidas de eco de esp&#237;n de baja resoluci&#243;n&#44; calibradas en T2&#44; en planos axial&#44; sagital y coronal para ser utilizadas como im&#225;genes scout de referencia&#46; Los par&#225;metros de imagen de estas im&#225;genes fueron&#58; tiempo de eco efectivo &#40;TEeff&#41; &#61; 36 ms&#59; tiempo de repetici&#243;n &#40;TR&#41; &#61; 3 s&#59; longitud del tren de ecos &#40;ETL&#41; &#61; 8&#59; campo de visi&#243;n &#40;FOV&#41; &#61; 6 &#215; 6 cm<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#59; tama&#241;o de la matriz &#40;MTX&#41; &#61; 128 &#215; 128&#59; grosor de corte &#40;ST&#41; &#61; 2 mm&#59; separaci&#243;n entre cortes &#40;gap&#41; &#61; 0&#44;5 mm&#59; n&#250;mero de cortes de im&#225;genes &#40;NS&#41; &#61; 25 axiales&#44; 10 sagitales&#44; 11 coronales&#59; n&#250;mero de medias &#40;NA&#41; &#61; 1&#46; Se obtuvieron im&#225;genes de eco de esp&#237;n r&#225;pido de alta resoluci&#243;n en T2 en planos sagitales que conten&#237;an la lesi&#243;n y el lado contralateral&#46; Los par&#225;metros experimentales de estas im&#225;genes fueron&#58; TEeff &#61; 30 ms&#59; TR &#61; 4 s&#59; ETL &#61; 8&#59; FOV &#61; 3&#44;2 &#215; 3&#44;2 cm<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#59; MTX &#61; 256 &#215; 256&#59; ST &#61; 1 mm&#59; gap &#61; 0&#44;1 mm&#59; NS &#61; 18&#59; NA &#61; 12&#59; tiempo experimental &#61; 25 min 36 s&#46; Los datos de resonancia magn&#233;tica se obtuvieron y fueron procesados en un ordenador con el sistema operativo Linux mediante el software Paravision 5&#46;1 &#40;Bruker BioSpin GmbH&#44; Ettlingen&#44; Alemania&#41; &#40;fig&#46; 2&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Figura 2 Durante les pruebas de resonancia magn&#233;tica se control&#243; la temperatura y la frecuencia card&#237;aca a los animales anestesiados&#46; Se obtuvieron im&#225;genes sagitales en alta resoluci&#243;n de secuencias r&#225;pidas de eco de esp&#237;n ponderadas en T2 de los tendones lesionados rotuliano y contralateral&#46;" src="277v52n194-90461315fig2.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 2 </span>Durante les pruebas de resonancia magn&#233;tica se control&#243; la temperatura y la frecuencia card&#237;aca a los animales anestesiados&#46; Se obtuvieron im&#225;genes sagitales en alta resoluci&#243;n de secuencias r&#225;pidas de eco de esp&#237;n ponderadas en T2 de los tendones lesionados rotuliano y contralateral&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">An&#225;lisis histol&#243;gico</span></p><p class="elsevierStylePara"> Los animales fueron sacrificados 7 d&#237;as despu&#233;s de la lesi&#243;n mediante la administraci&#243;n intraperitoneal de una sobredosis de ketamina &#40;75 mg&#47;kg&#41; y xilazina &#40;10 mg &#47; kg&#41;&#46; Inmediatamente se extrajeron los tendones de ambas piernas desde la r&#243;tula a la inserci&#243;n de la tibia&#44; incluyendo la almohadilla grasa de Hoffa&#46; Las muestras se congelaron en 2-metilbutano &#40;Alfa Aesar&#44; Johnson Matthey Company&#44; Karlsruhe&#44; Alemania&#41; previamente sobreenfriadas en nitr&#243;geno l&#237;quido y almacenadas a &#8722;80 &#176;C hasta su uso&#46; Las muestras de tend&#243;n se seccionaron longitudinalmente &#40;10 &#181;m de espesor&#41; utilizando un criotomo &#40;Leica Microsystems&#44; Wetzlar&#44; Alemania&#41; a &#8722;20 &#176;C y se montaron en un portaobjetos de Polilisina<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;VWR&#44; Lovaina&#44; B&#233;lgica&#41;&#46; Para el an&#225;lisis histol&#243;gico se utilizaron secciones consecutivas de tendones congelados&#46; Se realiz&#243; la tinci&#243;n de las muestras con hematoxilina-eosina &#40;1 min de hematoxilina y 15 s de eosina&#41;&#44; se lavaron con agua y se deshidrataron con soluciones de gradiente de etanol &#40;1 &#215; 50&#37; de etanol&#44; 2 &#215; 70&#37; de etanol&#44; 2 &#215; 90&#37; de etanol&#44; 2 &#215; 100&#37; de etanol&#44; 1 min cada uno&#41; y se aclararon con xileno &#40;5 s&#41;&#46; Despu&#233;s del secado con aire&#44; los portaobjetos se montaron con un medio DPX y un cubreobjetos &#40;VWR&#44; Madrid&#44; Espa&#241;a&#41;&#46; Se obtuvieron microfotograf&#237;as a trav&#233;s de un microscopio BX-61 &#40;Olympus&#41; equipado con una c&#225;mara DP72 &#40;Olympus&#41; y el software de tratamiento digital de im&#225;genes CellSens<span class="elsevierStyleSup">&#174;</span> &#40;versi&#243;n 1&#46;9&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Resultados</span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">An&#225;lisis de la lesi&#243;n del tend&#243;n rotuliano mediante resonancia magn&#233;tica</span></p><p class="elsevierStylePara"> Se compararon im&#225;genes sagitales mediante resonancia magn&#233;tica de tendones rotulianos sanos y lesionados&#46; No se detectaron diferencias de alineamiento o grosor de las fibras tendinosas a lo largo del tejido del tend&#243;n&#46; Se observ&#243; edema difuso que afectaba principalmente a las estructuras articulares y musculares &#40;fig&#46; 3&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Figura 3 Estudio comparativo mediante resonancia magn&#233;tica&#46; No se encontraron diferencias en la estructura del tend&#243;n rotuliano sano &#40;A&#41; y el tend&#243;n lesionado &#40;B&#41;&#46;" src="277v52n194-90461315fig3.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 3 </span>Estudio comparativo mediante resonancia magn&#233;tica&#46; No se encontraron diferencias en la estructura del tend&#243;n rotuliano sano &#40;A&#41; y el tend&#243;n lesionado &#40;B&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">An&#225;lisis macrosc&#243;pico de la lesi&#243;n del tend&#243;n</span></p><p class="elsevierStylePara"> Se encontraron diferencias macrosc&#243;picas manifiestas entre tendones sanos y lesionados&#46; As&#237;&#44; el tend&#243;n sano evidenciaba un color blanco brillante e intenso y una fuerte consistencia&#44; mientras que el tend&#243;n lesionado presentaba un color marr&#243;n amarillento y una apariencia gelatinosa&#46; Se observ&#243; que los tejidos periarticulares&#44; principalmente los m&#250;sculos esquel&#233;ticos adyacentes&#44; presentaban cambios de color y consistencia &#40;fig&#46; 4&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Figura 4 An&#225;lisis microsc&#243;pico&#46; Comparaci&#243;n del tend&#243;n sano &#40;izquierda&#41; y del lesionado &#40;derecha&#41;&#46; El tend&#243;n lesionado es de un color marr&#243;n amarillento y de una apariencia gelatinosa &#40;flecha y cabeza de flecha&#41;&#46;" src="277v52n194-90461315fig4.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 4 </span>An&#225;lisis microsc&#243;pico&#46; Comparaci&#243;n del tend&#243;n sano &#40;izquierda&#41; y del lesionado &#40;derecha&#41;&#46; El tend&#243;n lesionado es de un color marr&#243;n amarillento y de una apariencia gelatinosa &#40;flecha y cabeza de flecha&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">An&#225;lisis histol&#243;gico del tend&#243;n rotuliano</span></p><p class="elsevierStylePara"> El tend&#243;n contralateral sano mostr&#243; un aspecto uniforme&#44; presentando fibras de col&#225;geno compactas y bien alineadas&#46; Los tenocitos mostraron forma de huso y se localizaron en paralelo a la muestra de fibras tendinosas&#46; La estructura de la grasa de Hoffa mostr&#243; caracter&#237;sticas normales&#46; Por el contrario&#44; en el tend&#243;n lesionado se observ&#243; claramente una degeneraci&#243;n de la estructura de la fibra de col&#225;geno&#44; mostrando tambi&#233;n una estructura ondulada evidente y espacios vac&#237;os entre los haces de fibras adyacentes al nivel del tercio proximal del tend&#243;n rotuliano&#46; Tambi&#233;n se observ&#243; una fragmentaci&#243;n parcial de las fibras del tend&#243;n en el lugar de la inyecci&#243;n&#46; Asimismo&#44; se detect&#243; una clara desorganizaci&#243;n del tejido graso de Hoffa&#44; lo que sugiere su afectaci&#243;n y alteraci&#243;n como consecuencia de la administraci&#243;n de colagenasa &#40;fig&#46; 5&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><img alt="Figura 5 Estudio histol&#243;gico comparativo del tend&#243;n sano &#40;A&#41; y del lesionado &#40;B&#41;&#46; El tend&#243;n lesionado presenta degeneraci&#243;n de la estructura del col&#225;geno en el lugar de la punci&#243;n &#40;&#42;&#41;&#46;" src="277v52n194-90461315fig5.jpg"></img></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Figura 5 </span>Estudio histol&#243;gico comparativo del tend&#243;n sano &#40;A&#41; y del lesionado &#40;B&#41;&#46; El tend&#243;n lesionado presenta degeneraci&#243;n de la estructura del col&#225;geno en el lugar de la punci&#243;n &#40;&#42;&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Discusi&#243;n</span></p><p class="elsevierStylePara"> El principal hallazgo del presente estudio fue la demostraci&#243;n de la similitud de las alteraciones estructurales del tend&#243;n rotuliano de la rata&#44; tratado con colagenasa&#44; caracterizado por la desorganizaci&#243;n de las fibras de col&#225;geno y estructuras adyacentes&#44; con respecto a la tendinopat&#237;a rotuliana observada en la cl&#237;nica de los humanos&#46; Estos resultados sugieren que la administraci&#243;n de una &#250;nica dosis de colagenasa infiltrada guiada por ecograf&#237;a es eficaz para reproducir exactamente los cambios estructurales en la integridad de la regi&#243;n proximal del tend&#243;n rotuliano de la tendinopat&#237;a rotuliana humana&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> Por primera vez&#44; se gener&#243; un modelo animal que imita la degeneraci&#243;n del tejido tendinoso en el lugar anat&#243;mico m&#225;s com&#250;n observado en la tendinopat&#237;a rotuliana humana&#46; Se han desarrollado otros modelos animales de tendinopat&#237;a para inducir la degeneraci&#243;n tisular en la parte media del tercio del tend&#243;n rotuliano a trav&#233;s de una &#171;ventana&#187; creada quir&#250;rgicamente<span class="elsevierStyleSup">14-22</span>&#46; Este mecanismo de lesi&#243;n no reproduce la lesi&#243;n detectada en cl&#237;nica humana&#44; ya que los defectos creados quir&#250;rgicamente se generan en &#225;reas tendinosas distintas al sitio m&#225;s com&#250;n donde se produce la patolog&#237;a tendinosa&#44; por lo que se plantea la hip&#243;tesis que los mecanismos de reparaci&#243;n del tend&#243;n de estos modelos no reproducen la patolog&#237;a del tend&#243;n sometido a cargas de trabajo repetitivas<span class="elsevierStyleSup">35&#44;38</span>&#46; Nuestro modelo est&#225; dirigido a imitar la degeneraci&#243;n de las fibras proximales profundas&#44; ya que tanto la biomec&#225;nica como la relaci&#243;n de la regi&#243;n proximal del tend&#243;n rotuliano con las estructuras adyacentes&#44; principalmente con la almohadilla grasa de Hoffa&#44; son importantes&#44; no solo para el desarrollo de la tendinopat&#237;a&#44; sino tambi&#233;n en los procesos de cicatrizaci&#243;n del tend&#243;n<span class="elsevierStyleSup">39&#44;40</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> Se considera que la carga de trabajo excesiva del tend&#243;n durante un entrenamiento f&#237;sico intenso es la causa principal de la degeneraci&#243;n patol&#243;gica<span class="elsevierStyleSup">41</span>&#46; Por esta raz&#243;n&#44; se ha utilizado el entrenamiento como modelo para inducir la tendinopat&#237;a rotuliana<span class="elsevierStyleSup">36&#44;42&#44;43</span>&#46; El principal inconveniente de esta t&#233;cnica se basa en la necesidad de pasar un largo per&#237;o do de tiempo en entrenar a los animales con el fin de desarrollar los cambios patol&#243;gicos caracter&#237;sticos de la tendinopat&#237;a rotuliana humana&#46; En nuestra opini&#243;n&#44; ser&#237;a interesante crear un modelo combinado de degeneraci&#243;n del tend&#243;n rotuliano basado en una lesi&#243;n inicial mediante inyecci&#243;n intratendinosa a base de colagenasa en la regi&#243;n proximal profunda seguida de un per&#237;odo de entrenamiento f&#237;sico intenso con el fin de inducir m&#225;s r&#225;pidamente la degeneraci&#243;n patol&#243;gica caracter&#237;stica del tend&#243;n rotuliano&#46; Datos previos reportados en modelos de tendinopat&#237;a de Aquiles generados por la administraci&#243;n de colagenasa peritendinosa guiada por ecograf&#237;a sugieren que la administraci&#243;n de colagenasa puede conducir a tendinopat&#237;a en ratas y que la elastasa tambi&#233;n podr&#237;a estar implicada en el desarrollo de tendinopat&#237;a cr&#243;nica<span class="elsevierStyleSup">44</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> En nuestro estudio existen algunas limitaciones&#46; La primera es la peque&#241;a cantidad de animales &#40;n &#61; 4&#41; utilizada en el estudio&#46; En segundo lugar&#44; deber&#237;a optimizarse la dosis de colagenasa para reproducir exactamente los cambios caracter&#237;sticos en la tendinopat&#237;a rotular humana y prevenir el da&#241;o colateral de estructuras adyacentes al tend&#243;n&#46; Perucca Orfei et al&#46;<span class="elsevierStyleSup">45</span> generaron un modelo en el tend&#243;n de Aquiles de los ratones que reproduce estrechamente los cambios histol&#243;gicos observados en la tendinopat&#237;a de Aquiles en humanos&#46; Evaluaron el efecto de dos dosis de colagenasa administrada intratendinosa &#40;1 y 3 mg&#47;ml&#41;&#46; Aunque ambas dosis indujeron a la desorganizaci&#243;n de las fibras de col&#225;geno y al aumento de la celularidad&#44; el tratamiento con mayor dosis de colagenasa pudo inducir una mayor neovascularizaci&#243;n y degeneraci&#243;n de la grasa&#44; siendo tambi&#233;n cambios dependientes del tiempo&#46; En nuestro estudio estos cambios no se observaron&#44; ya que el tiempo transcurrido desde la administraci&#243;n de colagenasa al an&#225;lisis de tendones fue m&#225;s corto&#46; Adem&#225;s&#44; Perucca Orfei et al&#46; presentaron el tend&#243;n mediante una incisi&#243;n longitudinal de la piel&#44; mientras que nosotros utilizamos una t&#233;cnica m&#237;nimamente invasiva basada en la aplicaci&#243;n de colagenasa guiada por ecograf&#237;a para inducir tendinopat&#237;a en la regi&#243;n de las fibras proximales profundas espec&#237;ficas del tend&#243;n rotuliano con la perturbaci&#243;n m&#237;nima de las estructuras y tejidos de la articulaci&#243;n de la rodilla&#46; Adem&#225;s&#44; nuestro an&#225;lisis realizado por resonancia magn&#233;tica demuestra que el efecto de la colagenasa no se localiza exclusivamente a nivel del tend&#243;n&#44; sino que tambi&#233;n podr&#237;a afectar a las estructuras periarticulares&#44; circunstancia que no se ha discutido en estudios anteriores&#46;</p><p class="elsevierStylePara"> En resumen&#44; nuestro estudio sugiere que la administraci&#243;n de una soluci&#243;n de colagenasa guiada por ecograf&#237;a en la regi&#243;n proximal profunda del tend&#243;n rotuliano podr&#237;a constituir un modelo coherente para reproducir la degeneraci&#243;n y los cambios habitualmente vistos en la tendinopat&#237;a rotuliana en humanos&#46; Este nuevo modelo tambi&#233;n nos permitir&#225; desarrollar nuevas terapias dirigidas a mejorar y curar la tendinopat&#237;a rotuliana como un paso previo para iniciar ensayos cl&#237;nicos en pacientes humanos&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Financiaci&#243;n</span></p><p class="elsevierStylePara"> Este art&#237;culo no ha contado con ninguna fuente de financiaci&#243;n&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Conflicto de intereses</span></p><p class="elsevierStylePara"> Los autores declaran que no tienen ning&#250;n conflicto de intereses directamente relacionado con el contenido de este art&#237;culo&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Agradecimientos</span></p><p class="elsevierStylePara"> Los autores agradecen al Departament de Cirurgia de la Facultat de Medicina de la Universitat Aut&#242;noma de Barcelona &#40;UAB&#41;&#46; En el momento de la redacci&#243;n de este estudio&#44; David Dom&#237;nguez era estudiante de doctorado de la UAB y este trabajo forma parte de su tesis doctoral realizada en dicho departamento bajo la direcci&#243;n y supervisi&#243;n del Dr&#46; Gil Rodas y el Dr&#46; Mario Marotta&#46;</p><hr></hr><p class="elsevierStylePara"> Recibido el 22 de diciembre de 2016&#59;<br></br> aceptado el 11 de enero de 2017</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleItalic">Correo electr&#243;nico&#58;</span><a href="mailto&#58;david&#46;dominguez&#64;fcbarcelona&#46;cat" class="elsevierStyleCrossRefs">david&#46;dominguez&#64;fcbarcelona&#46;cat</a> &#40;D&#46; Dom&#237;nguez&#41;</p>"
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Article information

ISSN: 02133717
Original language: Spanish

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